卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD Bioscience）多年來致力于抗體制備研究。我們擁有經驗豐富的抗體制備團隊，積累了成熟的技術經驗，具有齊全的抗體生產設備，能夠為客戶提供優質的重組單克隆抗體制備服務，包括兔源，鼠源，駝源，羊源，雞源等。 單個B細胞抗體制備技術相較于傳統的方法具有速度快、高通量、特異性強等優勢。利用該技術從篩選獲得的單B細胞中直接PCR獲取編碼抗體的基因，通過測序、表達載體構建、表達鑒定和純化一站式服務，卡梅德生物能夠為客戶在較短的周期內生產出擁有高特異性和高親和力的羊駝單克隆抗體。 |
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羊駝單B細胞單克隆抗體制備：
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羊駝產生兩種類型的抗體：(i) 由重鏈和輕鏈二聚體組成的常規抗體，以及 (ii) 一類只具有重鏈不含輕鏈，被稱為重鏈抗體（heavy Chain Antibody，hcAb）。如圖1中D所示，羊駝重鏈抗體缺少輕鏈，由4個HC和2個VH組成，其中VH區域又被稱為納米抗體或單域抗體（single domain antibody，sdAb）。和傳統抗體相比，羊駝抗體具有穩定性高、易于進行基因改造，免疫原性弱，特異性強，親和力高，在真核或者原核系統中表達量高等眾多優點。并因其與人抗體重鏈氨基酸序列高度相似，更易于進行人源化改造，在當前的抗體藥研究領域中應用廣泛。
單B細胞單抗制備技術是近些年來新興的一種抗體制備技術?？返律锢么思夹g，從羊駝外周血或免疫器官中提取淋巴細胞，通過分選技術鑒定和分離出特定的B細胞后將其進行單細胞培養，使用逆轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）和抗體特異性引物鑒定單B細胞分泌抗體的特異性，通過PCR技術擴增出特異性抗體基因，將其克隆到表達載體中，并在客戶指定的系統中進行表達，純化好的抗體通過ELISA等方法進行表達驗證?？返律锢脝蜝細胞單抗制備技術獲得的抗體品質出眾，且成功率高。
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圖1 A，傳統IgG；B,傳統抗體Fab片段；C，傳統抗體的單鏈Fv片段；D，重鏈抗體或駝類抗體；E，駝類抗體的VH區域或單域抗體（sdAb）
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制備流程：
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服務內容：
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步驟 |
服務內容 |
交付材料 |
周期 |
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抗原制備（可選） |
半抗原改造/完全抗原制備 |
改造產物及鑒定結果 |
具體分析 |
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動物免疫 |
抗原乳化，免疫羊駝4-5次；
ELISA效價測定；
抗血清采集 |
免疫血清；
ELISA檢測結果；
實驗記錄 |
8-10周 |
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B細胞富集和篩選 |
PBMC分離；
FACS Assay、ELISA?Assay； |
高通量篩選結果報告，
保證序列多樣性的FACS binder；
ELISA檢測結果報告，陽性克隆株 |
6-8周 |
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B細胞抗體測序 |
RT-PCR；
高通量測序 |
測序原始數據；
特異性序列 |
1周 |
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抗體表達與純化（可選） |
抗體小規模轉染或放大 |
表達質粒，純化抗體 |
具體分析 |
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樣品要求：
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客戶提供 |
要求 |
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重組蛋白 |
* ≥3.5 mg，要求蛋白純度>85%，蛋白要求分子量大于10 kDa，可溶性蛋白濃度在0.5~5mg/mL之間。若要求抗原親和純化，需額外提供15 mg左右重組蛋白 |
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多肽與小分子 |
* 裸肽≥15mg，多肽純度>90%，不少于10個AA，偶聯KLH/BSA/OVA或其他載體蛋白；小分子需要預先對結構進行評估 |
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服務優勢：
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--周期短
--不限種屬
--可獲得抗體序列
--得到的抗體具有更高的特異性和親和力
--豐富的經驗積累
--嚴格的質控體系
--服務可定制：提供個性化定制服務滿足客戶的實際需求
如何訂購？
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