卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD?Bioscience）多年來致力于蛋白表達研究。我們的科學家積累了豐富的實驗操作經驗，能夠在較短時間內快速將指定實驗完成，同時保證檢測結果準確、客觀、可信?？返律锝⒘送晟频牡鞍灼脚_，擁有精密的蛋白檢測設備及技術，能夠提供從重組蛋白制備到蛋白表達及純化，蛋白功能研究等一站式技術服務，保證高品質的服務內容。我們可以為客戶提供Western Blot等常用的免疫學檢測服務。
Western Blot即蛋白質印跡法，又稱免疫印跡(immunoblotting)，是定性、定量檢測蛋白表達的常用技術方法之一。Western Blot的主要目的是檢測樣本（組織或細胞）中某種蛋白質（即靶蛋白）是否表達以及表達的相對豐度。通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品中目的蛋白特異性識別結合，根據著色的位置和著色深度可以分析細胞或組織中特定蛋白水平的表達情況。該技術是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術，因此兼備SDS-PAGE的和固相免疫測定兩種技術的高分辨力和高特異性，其作為一種方便可靠的研究工具，與質譜和蛋白質芯片等技術在蛋白質組學中發揮著重要作用。
Western Blot實驗服務發展到如今已經成熟，應用也很廣泛。但是要得到一份背景清晰、條帶明亮、真實客觀的實驗結果并不容易，需要投入大量的時間和精力?？返律镌趯嶒灢僮骷毠澤暇哂锌偨Y的技巧，有著嚴格質控點，嚴謹的預實驗設置，能夠針對不同客戶的樣品量身定制不同的實驗方案，并提供清晰、完整的Western Blot實驗結果，節省客戶寶貴的科研時間，以高質量滿足客戶需求。
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項目 |
Western Blot實驗 |
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實驗原理 |
* 該技術是根據抗原抗體的特異性結合原理來檢測復雜樣品中的某種蛋白質。通過聚丙烯酰胺凝膠電泳分離細胞或者組織樣本中的蛋白，經轉膜、封閉后目標蛋白與特有性一抗結合，再與辣根過氧化物酶（HRP）標記的第二抗體起反應，經過底物顯色，分析曝光條帶的位置和灰度分析獲知目標蛋白在樣本中的表達情況 |
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應用 |
* 廣泛應用于蛋白表達水平檢測
* 鑒定某種蛋白質，也可以對目標蛋白進行定量和半定量的分析
* 可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后續分析 |
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優點 |
* 所需要的設備方便，成本低，使用靈活
* 操作簡單，結果一般比較穩定，而且陽性結果一般較為可靠
* 結果分析與質譜相比較為容易 |
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Western Blot實驗主要流程：
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目前，Western Blot因其便捷的優點，加之電泳及電轉設備、抗體和信號檢測系統的成熟商品化，多種技術不斷進步共同提高了檢測的靈敏度，在一般的實驗室中都能夠進行Western blot技術操作，但在實驗過程中也會經常遇到各種問題。
Western Blot實驗中經常出現的問題及對策：
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實驗問題 |
可能原因 |
推薦辦法 |
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目的條帶未顯現 |
目的蛋白的表達量過低 |
* 提高上樣量，濃縮目的蛋白，采用更高靈敏度的試劑盒 |
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使用抗體效價不足 |
* 使用新配制的一抗，避免反復凍融；增加一抗或者二抗濃度，適當延長孵育時間 |
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轉膜效率低 |
* 選擇合適的轉膜方式，提高轉膜效率 |
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非平行、彎曲條帶 |
電泳遷移速度過快或遷移溫度過高 |
* 調整電泳設置如PH值、電壓等，電泳時降低環境溫度 |
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背景過高 |
封閉條件不合適 |
* 延長封閉時間或更換封閉劑 |
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抗體濃度過高 |
* 降低一抗/二抗濃度并延長孵育時間 |
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抗體與封閉劑發生交叉反應 |
* 加溫和去污劑如Tween20 |
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服務優勢：
--針對不同的蛋白樣品，卡梅德生物采用不同的蛋白濃度測定方法（Lowry法或BCA法）
--保證實驗的質量，嚴格的QC質控：利用內參準確定量，同一樣品，蛋白濃度定量值多次實驗間差異小于8%
--不同人員之間可重復性：保證結果的準確性
--完整的技術服務，我們能夠提供從基因合成，細胞轉染，載體構建，蛋白表達及純化，蛋白功能研究等技術服務
--多年的抗體研究經驗，對抗體選擇具有豐富的知識儲備，能從根源上避免假陽性結果
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如何訂購？
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