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卡梅德生物(KMD Bioscience)從事微生物基因編輯多年,構建了完善的基因編輯技術平臺,我們的基因編輯技術平臺擁有經驗豐富的技術人員,標準化、有效的實驗流程以及完善的實驗設備。我們的科學家可根據客戶的具體需求進行一對一的方案定制,提供多種微生物的編輯服務,以滿足客戶的需求。
CRISPR-Cas作為一種高度靈活的基因組編輯研究工具,逐步在改變生物和生物醫學研究。CRISPR-Cas系統是原核生物的一種天然免疫系統,用來消滅外來的質體或者噬菌體,某些細菌在遭到病毒入侵后,能夠把病毒基因的一小段存儲到自身的 DNA 里一個稱為 CRISPR 的存儲空間,當再次遇到病毒入侵時,細菌能夠根據存寫的片段識別病毒,將病毒的DNA切斷而使之失效。該系統使研究人員能夠以多種不同的方式準確地操縱基因組。目前,CRISPR-Cas系統已被廣泛應用于不同的生物學研究領域,如細胞系和動物模型的開發以及其他領域,如藥物、食品和燃料生產。
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圖1 CRISPR-Cas系統
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卡梅德生物可為客戶提供傳統λRed同源重組法和CRISPR/Cas9技術,以實現高度準確和有效的無疤痕基因組編輯。我司提供的微生物基因編輯系統主要包括大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、沙門氏菌、畢赤酵母、釀酒酵母、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、銅綠甲假單胞菌和乳酸菌等??蛻糁恍鑼⑾胍萌?敲除的基因和菌株的信息發送給我們,也可以根據自己的需求指定其他微生物菌屬,卡梅德生物的科學家可根據客戶的項目需求提供專屬的定制方案和高質量的微生物編輯服務。
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微生物基因編輯系統:
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服務內容:
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服務類型 |
技術原理 |
基因敲除 |
* 原理:Cas9可以對靶基因組進行剪切,形成DNA的雙鏈斷裂。在通常情況下,細胞會采用有效的非同源末端連接方式對其進行修復。但過程中通常會發生錯配現象,造成移碼突變,使靶標基因失去功能,從而實現基因敲除。 |
基因敲入 |
* 原理:當DNA雙鏈斷裂后,如果有DNA修復模板進入到細胞中,基因組斷裂部分會依據修復模板進行同源重組修復(HDR),從而實現基因敲入。修復模板由需要導入的目標基因和靶序列上下游的同源臂組成。 |
基因抑制、基因激活 |
* Cas9的特點:能夠自主結合和切割目的基因;
* 原理:通過點突變的方式使Cas9的兩個結構域RuvC-和HNH-失去活性,形成的dCas9只能在sgRNA的介導下結合靶基因,而不具備剪切DNA的功能。 |
功能基因組篩選 |
* 原理:利用CRISPR-Cas9進行基因編輯可以產生大量的基因突變細胞,因此利用這些突變細胞可以確認表型的變化是否是由基因或者遺傳因素導致的。 |
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服務優勢:
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--可根據客戶的需求進行一對一的方案定制,滿足客戶需求
--實驗周期短,節省客戶時間和成本
--成熟的實驗技術,標準化的實驗流程,實現無疤痕基因組編輯
--多種微生物的基因編輯系統,適用于客戶的多種項目
--可為新微生物開發?CRISPR?方法提供有力的技術支持
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如何訂購?
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參考文獻:
[1]?Egelie, K., Graff, G., Strand, S.?et al.?The emerging patent landscape of CRISPR–Cas gene editing technology.?Nat Biotechnol?34,?1025–1031 (2016).
[2]??Hsu, P. D., Lander, E. S. & Zhang, F. Development and applications of CRISPR-Cas9 for genome engineering. Cell 157, 1262–1278 (2014).
[3]?Mali, P. et al. RNA-guided human genome engineering via Cas9. Science 339, 823–826 (2013).