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卡梅德生物(KMD Bioscience)多年來致力于抗體領域研究。我們擁有經驗豐富的抗體制備技術人員,積累了大量的重組抗體和蛋白生產經驗,能夠向客戶提供高品質的抗體產品和技術服務??返律锝⒘顺墒斓目贵w平臺和噬菌體抗體展示技術平臺,能夠為客戶提供不同物種的重組單克隆抗體制備服務,包括兔源,鼠源,駝源,羊源,雞源及鯊魚類等。
豚鼠是一種在過敏反應和過敏研究中較為理想的抗體來源物種,也是在多種感染性疾病研究中重要的模式動物??返律锾峁﹥炠|的豚鼠重組單克隆抗體制備服務,利用噬菌體抗體展示技術,我們能夠為客戶在較短時間內生產擁有高特異性、高活性和高親和力的單克隆抗體。依托于完善的平臺建設,卡梅德生物著力于提供包括從抗原設計,合成與修飾,動物免疫,噬菌體文庫構建與篩選到下游抗體修飾與應用鑒定等一站式技術服務,滿足客戶的不同需求。
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采用傳統鼠源異種(小鼠-大鼠,小鼠-豚鼠)雜交瘤制備技術生產單抗雜交瘤細胞,其主要缺陷在于雜交瘤細胞僅能有限傳代培養不超過1到3個月,就會丟失單抗分泌能力。利用噬菌體文庫技術制備的雜交瘤能夠以抗體基因的形式保存在噬粒載體上,結合不同蛋白表達系統的優勢,如利用無細胞表達體系,可以實現無動物源生產并獲得高特異性和高親和力的重組單抗。
我們經過多年的技術累積,能夠分離不同物種的抗體可變區(Vλ, Vk, and VH)基因,將這些基因進行重組后克隆進入抗體骨架蛋白支架構建全長抗體庫。利用不同的篩選策略,如抗原遞減法,同時結合我們的多方式蛋白重組表達平臺進行重組抗體抗體表達(產量可達-5g/L),為客戶提供高特異性,高穩定性和高親和力的單克隆重組抗體。
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豚鼠單克隆抗體制備流程:
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服務內容:
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步驟 |
服務內容 |
交付材料 |
周期 |
半抗原改造 |
小分子改造 |
* 改造后的小分子衍生物LC-MS的鑒定結果 |
3-4周 |
完全抗原制備 |
卵清蛋白 |
* 完全抗原SDS-PAGE、UV或MALDI-TOF鑒定結果 |
1周 |
鑰孔藍蛋白 |
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人血清白蛋白 |
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人-γ球蛋白 |
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噬菌體抗體庫的制備 |
抗原乳化,免疫2-3只豚鼠5次 |
* PCR結果,免疫測定結果(含ELISA的效價和特異性測定結果),實驗記錄 |
16-18周 |
收集脾細胞(或者外周血淋巴細胞),可變區基因分離 |
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噬粒構建,轉染表達,文庫構建 |
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文庫篩選(固相篩選、液相篩選等) |
* 抗體序列,文庫篩選結果,ELISA陽性克隆鑒定結果,實驗報告 |
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重組抗體表達 |
抗體篩選,構建表達質粒,真核或原核表達重組抗體 |
* 重組抗體,表達質粒,克隆菌株,實驗報告 |
1-2個月 |
服務優勢:
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--高抗體效價:制備得到高效價和高靈敏度的豚鼠單抗,保證交付量,滿足實驗需求
--能夠大規模制備抗體
--嚴格的質控體系,經驗豐富的實驗技術人員,GMP級的操作水平,保證結果可靠
--多種表達體系與方案可供選擇
--豐富的抗體表達載體資源
--擁有成熟的抗體和重組蛋白平臺,實現項目一體化
--抗原免疫多樣化:客戶可以提供小分子、多肽、修飾多肽、蛋白、融合蛋白、修飾蛋白等作為抗原進行單克隆抗體制備
--服務可定制:根據客戶需求制備,為每一個客戶量身定制實驗方案,滿足每一位客戶的特殊需求
不同物種的單克隆抗體比較:
類型 |
特點 |
* 制備手段和技術成熟,是常用的模式物種
* 抗原需求量少,成本低
* 批次間差異小,可快速、連續生產 |
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* 制備體系成熟,制備成本相對低廉
* 特異性強、與鼠類相比具有更高的親和力和活性
* 更廣泛的抗原適應范圍 |
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* 為重鏈抗體,擁有廣泛的抗原決定簇的結合功能
* 因結構中的二硫鍵存在,穩定性更強
* 更易進行人源化改造 |
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* 體型較大,適合較大量的血清或抗體制備
* 抗體高效價,穩定性高,產品商業化較好,良好的適用性
* 應用領域廣泛,涵蓋檢測治療等多個領域 |
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