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卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于抗體制備研究。我們擁有經驗豐富的抗體制備團隊,積累了成熟的技術經驗,具有齊全的抗體生產設備,能夠為客戶提供優質的重組單克隆抗體制備服務,包括兔源,鼠源,駝源,羊源,雞源等。
與小鼠單抗相比,兔單抗具有親和力高、識別的抗原表位更豐富等優點,廣泛應用于科研,診斷和治療。兔單克隆抗體的親和力KD通常處于皮摩爾水平,而大多數小鼠單克隆抗體的KD處于納摩爾或亞納摩爾水平,兔單克隆抗體的親和力是小鼠的100倍;兔的免疫系統能夠識別細微的抗原表位差異,產生高特異性針對于該抗原表位的單克隆抗體,并且具有更廣的抗原表位識別。
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單B細胞單抗制備優勢:
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類目 |
單B細胞技術 |
雜交瘤技術 |
噬菌體展示技術 |
抗體 |
天然 |
天然 |
非天然 |
抗體親和力 |
高 |
高 |
中等 |
可成藥性 |
高 |
高 |
低 |
時間 |
16~20周,可選快速免疫 |
20~26周,可選快速免疫 |
16~20周,可選快速免疫 |
抗體基因序列 |
直接獲得 |
需要進一步測序 |
直接獲得 |
抗體多樣性 |
高 |
中等 |
中等 |
所能篩選的種屬 |
不限種屬 |
鼠、兔 |
不限種屬 |
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兔單B細胞技術抗體制備:
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卡梅德生物單B細胞單抗制備基于流式細胞分選技術,利用每個B細胞只產生一種特異性抗體的特性,直接從單個B細胞中擴增出抗體基因,通過重組表達獲得特異性抗體?;?/span>單B細胞技術,可以在完成動物免疫后直接從外周血中獲取陽性B細胞并克隆抗體基因序列,得到的兔單克隆抗體具有高特異性、高活性和高親和力等突出優勢。為了滿足客戶的不同需求,卡梅德生物能夠提供從抗原設計,合成與修飾,到動物免疫,單B細胞富集篩選,表達與純化,功能驗證等一站式技術服務。
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制備流程:
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服務內容:
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服務內容 |
交付材料 |
周期 |
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動物免疫
PBMC分離 |
免疫兔子4-5次 ELISA效價測定 外周血采集
PBMC分離 |
ELISA檢測結果 標準實驗記錄
PBMC,1×106?cells*10支 |
4-10周
可選擇標準免疫或快速免疫 |
流式分選 |
PBMC流式分選 |
標準實驗結果記錄 |
1-2個工作日 |
單B細胞
培養篩選 |
5~20板96孔板單B細胞培養和ELISA篩選 |
陽性克隆篩選結果
標準實驗記錄 |
2~3周 |
陽性克隆測序 |
至少20個陽性克隆進行RT-PCR和測序 |
RT-PCR結果 測序原始數據 特異性序列
標準實驗記錄 |
1周 |
載體構建
抗體表達純化 |
哺乳表達載體構建 細胞轉染
ELISA驗證 |
至少3個陽性克隆序列 表達載體 純化抗體500ug/個陽性克隆 ELISA檢測結果
標準實驗報告 |
5~6周
可選其他增值驗證方法 |
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樣品要求:
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客戶提供 |
要求 |
重組蛋白 |
* ≥2.5 mg,要求蛋白純度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白濃度在0.5~5mg/mL之間。若要求抗原親和純化,需額外提供10 mg左右重組蛋白 |
多肽與小分子 |
* 裸肽≥10 mg,多肽純度>90%,不少于10個AA,偶聯KLH/BSA/OVA或其他載體蛋白;小分子需要預先對結構進行評估 |
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服務優勢:
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-- 周期短
-- 不限種屬
-- 可獲得抗體序列
-- 得到的抗體具有更高的特異性和親和力
-- 豐富的經驗積累
-- 嚴格的質控體系
-- 服務可定制:提供個性化定制服務滿足客戶的實際需求
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如何訂購?
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參考文獻:
(1) Gross A, Schoendube J, Zimmermann S, et al. Technologies for Single-Cell Isolation. Int J Mol Sci. 2015;16(8):16897-16919.