卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD Bioscience）多年來致力于免疫檢測產品與技術研究，擁有完善的免疫檢測技術、多種細胞學實驗體系，卡梅德生物建立了完善的細胞培養平臺，能夠提供給客戶多種細胞學基礎實驗，可以提供優質的免疫檢測服務—雙熒光素酶標記基因檢測。我們擁有眾多實驗技術人員，積累了豐富的實驗經驗，對每一個實驗步驟均有獨到的研究和操作，能夠憑借多年成熟技術水平，得到穩定有效的實驗結果?？返律锞邆涑墒斓?/span>細胞生物學服務平臺，能夠提供包括免疫熒光，細胞凋亡檢測，熒光原位雜交檢測服務，細胞劃痕實驗，細胞流式檢測等多種服務。我們可以根據客戶的實際要求，能制定個性化實驗方案供客戶選擇，節省寶貴的科研時間。
卡梅德生物提供的雙螢光素酶標記基因檢測系統是一種基于螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶體內表達和催化的基因報告技術。熒光素酶是生物體內催化熒光素或脂肪醛氧化發光的一類酶的總稱，來自于自然界能夠發光的生物。熒光素酶是理想的報告基因，因為哺乳動物細胞中不含內源性熒光素酶，一旦轉錄完成立刻就生成功能性的熒光素酶。熒光素酶催化熒光素氧化，在其氧化的過程中，會發出生物熒光，因此可通過對熒光素酶報告基因的表達檢測確認miRNA對靶基因的調控效果。雙熒光素酶通常是指螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶。由于兩種酶沒有種源同源性，對應不同的反應底物，反應中沒有交叉干擾，且在動物體內無內源性表達，使其在雙報告實驗中得到廣泛應用。
單報告基因實驗中往往會受到各種實驗條件的影響，卡梅德生物提供的雙熒光素酶標記基因檢測優勢在于系統中含有在同一細胞中同時表達的兩種熒光素酶。通過共轉染的“對照”作為內參為試驗提供一基準線，經過歸一化，可以盡可能地減小細胞活性和轉染效率等外在因素對實驗的影響，減少內在的變化因素所削弱的實驗準確性，保證實驗數據的可信度。
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免疫學檢測服務 —??雙熒光素酶標記基因檢測：
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項目 |
雙熒光素酶標記基因檢測 |
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實驗原理 |
* 該技術實驗原理是：將目的基因的轉錄調控元件（即5’啟動子區）克隆進帶有熒光素酶基因質粒的上游，或將目的基因的3’-UTR區克隆進帶有熒光素酶基因質粒的下游，構建成報告基因(reporter gene)質粒；通過轉染細胞，用適當藥物等處理細胞后裂解細胞，測定螢光素酶活性；通過螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用；海腎熒光素酶用來做轉染的內參，以校正不同樣品之間轉染的轉染效率 |
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應用 |
* 啟動子與轉錄因子相互作用檢測
* 潛在增強子/抑制子等調控子核心元件檢測
* 潛在啟動子/啟動子核心區域檢測
* 啟動子區可能的轉錄因子結合位點檢測
* 病毒/細胞相互作用
* 藥物等化學誘導因素對啟動子活性的調節（抑制或增強）
* 射線等物理誘導因素對啟動子活性的調節（抑制或增強）
* miRNA與3’UTR相互作用檢測??????? |
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優點 |
* 優越的靈敏度，高于Western blot 1000倍以上
* 內源性低，哺乳動物無內源性表達
* 熒光素酶檢測不受細胞內其他物質影響
* 發光檢測，檢測方便快捷
* 使用范圍廣，可檢測細胞內任何分子 |
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圖1 構建載體與轉染細胞：分別構建含有螢火蟲（firefly）和海腎(renilla)熒光素酶基因載體，共轉染細胞。收集細胞裂解液，加入兩種酶相應的底物，根據熒光比例進行啟動子表達水平定量分析。
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雙熒光素酶標記基因檢測服務主要實驗流程：
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服務優勢：
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--經驗豐富的實驗操作水平和實驗流程，具有可靠的統計學原理，每組實驗重復三次
--豐富的實驗經驗，擁有資深的技術人員和服務部門，實驗人員具有多年實驗成功經驗，能夠確保實驗數據真實可信，得到理想的實驗結果
--擁有完善配套檢測設備，進口的儀器試劑，可對結果進一步進行分析
--完整的信息分析，提供詳細完整的雙熒光素酶標記基因檢測實驗報告，包括實驗數據，圖片，結果分析等
--具有成熟的細胞培養平臺，能夠為客戶制定個性化實驗方案，提供真正的一站式技術服務體驗
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