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卡梅德生物(KMD Bioscience)從事微生物基因編輯多年,已擁有了完善的基因編輯技術平臺,我們的基因編輯技術平臺擁有經驗豐富的技術人員,有效的實驗流程以及完善的實驗設備。我們的科學家可根據客戶的具體需求進行一對一的方案定制,提供多種微生物的編輯服務,以滿足客戶的需求。
沙門氏菌是一種兼性厭氧革蘭氏陰性棒狀細菌。沙門氏菌屬腸桿菌科,是人類和動物的一種重要的醫學病原體。在我國,由沙門氏菌引起的食物中毒占細菌性食品中毒事件的40%。沙門氏菌形成了一個復雜的細菌群,包括兩個種和六個亞種,包括超過2579個血清型。目前在沙門氏菌屬中確認有兩個種,S.enterica 和 S. bongori。沙門氏菌選擇性地靶向腫瘤組織的特性也使其成為腫瘤靶向性治療的理想載體。沙門氏菌作為一個胞內寄生菌, 具有在腫瘤組織內有效地復制和有效抑制腫瘤生長的特性。它在基因工程改造后可以作為腫瘤基因治療的載體在肝癌、胃癌、大腸癌等的體內外應用。
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傳統λRed同源重組法:
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沙門氏菌基因敲除的傳統方法是利用其自身的Rec A同源重組系統編碼的RecA和RecBCD蛋白介導DNA的同源重組。但是以該系統為基礎的基因打靶存在較多的缺點:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,線性的打靶DNA將被降解,打靶基因必須整合于戴體上才能進行同源重組;其次,打靶片段需要較長的同源臂,往往長達幾百個堿基,而且同源重組效率低,往往不能得到所需的重組子。
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圖1?傳統λRed同源重組法
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CRISPR/Cas9基因編輯技術:
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CRISPR-Cas9基因編輯技術就是通過人工設計的 sgRNA(guide RNA)來識別目的基因組序列,并引導 Cas9 蛋白酶進行有效切割 DNA 雙鏈,形成雙鏈斷裂,損傷后修復會造成基因敲除或敲入等,最終達到對基因組DNA 進行修飾的目的。相較于傳統的同源重組敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因編輯技術速度更快,無痕,結果更準確,非常便于您開展后續的實驗研究。
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?圖2 CRISPR/Cas9基因編輯技術
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服務內容:
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服務內容 |
周期 |
基因敲除 |
客戶提供:
* 需改造的菌株信息
* 敲除的序列信息 |
5-8周 |
基因敲入或點突變 |
客戶提供:
* 需改造的菌株信息
* 敲除的序列信息/突變位點信息 |
5-8周 |
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卡梅德生物科技多年致力于微生物基因組編輯服務,主要可為您提供傳統λRed同源重組法和CRISPR/Cas9技術實現高度準確和有效的無疤痕基因組編輯。我司提供的微生物基因編輯系統主要包括大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、沙門氏菌、畢赤酵母、釀酒酵母、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、銅綠甲假單胞菌和乳酸菌等。您也可以根據自己的需求指定其他微生物菌屬,具體情況還需與我們專業的技術人員聯系。
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服務優勢:
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--快速的實驗周期,節省客戶成本
--成熟的實驗技術,實現無疤痕基因組編輯
--多種微生物的基因編輯系統,適用于客戶的多種項目
--可為新微生物開發 CRISPR 方法提供有力的技術支持
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