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卡梅德生物(KMD Bioscience)多年來致力于抗體制備研究。公司擁有專業的抗體制備技術人員,積累了多年的抗體制備經驗。我們堅持提供高質量的抗體生產服務,建立了成熟完善的抗體制備平臺,能夠為客戶提供不同物種的單克隆抗體定制服務。憑借多年的噬菌體展示技術項目經驗,我們已成功實現牛單克隆抗體的生產制備,特別是具有超長CDR3(Complementarity Determining Region 3)的抗體。
在抗體相關研究中,??梢援a生具有超長CDR3環和少數可變區域的抗體。天然條件下,大約10%的??贵w含有這種超長CDR3結構域,該環形成一個類似繩結的形狀并主要介導了抗體對抗原的親和力,使其具有更高的抗原結合能力。為了克服與長環相關的構象熵損失機制,牛利用二硫鍵來固定超長CDR3結構域。我們承諾為客戶提供高免疫親和力的牛單克隆抗體制備以及相關檢測服務,保證交付量,滿足實驗需求。
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牛單克隆抗體特點:
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牛單克隆抗體在研究抗原結構方面具有獨特的優勢。??贵w的超長CDR3環是其他物種中最長的CDR3環(50-61個氨基酸),有利于識別深藏的表位。相關結構和深度測序分析表明,CDR3超長環含有偶數個半胱氨酸,形成一種獨特的結構,其中半胱氨酸參與構成由β鏈“柄”支撐的多樣化二硫鍵“旋鈕”結構域。這種長CDR3環使??贵w更有效地攻擊各種細菌和病毒或抓住分子目標,特別是傳統抗體無法識別的抗原,如GPCRs。我們自主設計的實驗方案,可以更大程度得獲得高純度、特異性強的牛單克隆抗體。
卡梅德生物能夠提供基于噬菌體展示技術的牛單克隆抗體制備服務。我們也可以根據您的需求,為您制定個性化的實驗方案,如多肽抗原的設計,蛋白抗原的制備等。
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牛單抗制備流程:
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服務項目流程:
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步驟 |
服務內容 |
周期 |
抗原準備與動物免疫 |
* 注射抗原,進行5-7次免疫
* 采集血清,ELISA檢測血清效價
* 提供免疫詳細報告 |
10-14周 |
細胞分離 |
* 收集免疫后的牛血進行細胞分離
* 分選抗原特異性免疫細胞
* cDNA文庫建立 |
1-2周 |
基因擴增 |
* PCR擴增目的基因
* 測序 |
4-5周 |
融合抗體表達 |
* 構建載體
* 融合抗體表達
* 篩選陽性克隆 |
6-7周 |
功能驗證 |
* BLI驗證 |
1周? |
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樣品要求:
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客戶提供 |
要求 |
重組蛋白 |
* ≥3.5 mg,要求蛋白純度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白濃度在0.5~5mg/mL之間。若要求抗原親和純化,需額外提供15mg左右重組蛋白 |
多肽與小分子 |
* 裸肽≥15mg,多肽純度>90%,不少于10個AA,偶聯KLH/BSA/OVA或其他載體蛋白;小分子需要預先對結構進行評估 |
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交付結果:
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--所有單克隆抗體超長CDR3H序列信息及原始數據
--來自血液、淋巴和脾細胞的B細胞(>5x106/項目);cDNA文庫,3-4瓶/項目
--構建完成的表達載體
--高純度融合抗體(>90%)
--實驗報告和原始數據:包括SDS-PAGE、ELISA檢測等結果,并根據客戶需求,提供抗體驗證結果,如Western Blot、SPR等
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服務優勢:
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--pM級的親和性和高特異性
--豐富的經驗積累,嫻熟的操作水平,提高細胞融合成功存活率,保證實驗成功率
--嚴格的質控體系,標準化的操作流程,保證交付高質量的抗體
--多種抗體純化技術與方案可供選擇
--抗原免疫多樣化:可接受蛋白,多肽以及各種小分子抗原,能夠完成從抗原制備到抗體生產的一站式技術服務
--抗體檢測方法多樣化:ELISA,WB,SPR等多種抗體質量檢測技術,能夠全面的評估抗體質量
--完善的平臺建設:擁有成熟的抗體、蛋白平臺,多種表達體系可供選擇,多種免疫途徑,同步實驗,為得到更優質的單抗提供了保證
--完整的結果分析,提供詳細實驗流程報告以及交付產品
--服務可定制:提供個性化定制服務滿足客戶的實際需求
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