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卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于蛋白檢測研究。內毒素是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種成分,對宿主具有毒性,因此需要對內毒素含量進行檢測與控制,以免重組蛋白應用于動物實驗時,宿主產生不良反應,進而影響實驗結果。依托于成熟的技術及完善的檢測設備,我們能夠為來自研究、臨床、環境實驗室以及制藥或醫療器械行業的客戶提供內毒素檢測服務。
卡梅德生物擁有經驗豐富的科學家,可以提供完整的內毒素領域解決方案。我們搭建了多種靈活的快速檢測平臺,能夠實現實驗室的嚴格管理和一致性,確保準確、方便、實時完成內毒素檢測。此外,卡梅德生物深耕蛋白領域多年,堅持為客戶提供從重組蛋白表達與制備,到蛋白純化,蛋白測序,蛋白標記與修飾等真正一站式技術服務。
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內毒素檢測:
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卡梅德生物科技采用的內毒素檢測方法是動態濁度法,來自《2015版中國藥典》。
動態濁度法是指通過檢測反應混合物的濁度到達預先設定的吸光度所需要的反應時間,或是檢測濁度增加速度來檢測內毒素的方法。在適宜的條件下(溫度,pH值及無干擾物質),細菌內毒素激活C因子,引起一系列酶促反應,使鱟試劑產生凝集反應形成凝膠。隨著凝膠的形成,反應液的吸光度(OD值,濁度)增加,OD值增加的速度與內毒素濃度成正相關。換言之,OD值上升某一預設限值(啟動OD)所需要的時間(定義為啟動時間)與內毒素濃度成負相關,啟動時間的對數與內毒素濃度的對數成線性關系,據此,可以定量檢測供試品的內毒素濃度??蛻粢部梢砸笪覀兲峁┌攵糠椒?凝膠法進行樣品內毒素限度水平檢測。
內毒素檢測反應原理圖:
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實驗流程:
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步驟 |
具體內容 |
1.動態光度測定儀器的設定 |
* 預熱儀器,設置孵育溫度為37℃,設定讀板波長為340nm,設定讀取波長和時間 |
2. 標準內毒素溶液配制 |
* 標準品設置濃度點:0.5,0.25,0.125,0.0625EU/ml 或10,1,0.1,0.01EU/ml |
* 取內毒素工作標準品1支,加入適量(0.5 ml-1.2 ml)細菌內毒素檢查用水,置旋渦混合器上劇烈振搖3-5分鐘 |
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* 標準毒素溶液每一步操作取樣之前都需要旋渦振蕩30秒以上 |
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3. 設置陰性對照 |
* 細菌內毒素檢查用水,其他操作與樣品相同 |
4. 鱟試劑的溶解 |
* 按標示量加細菌內毒素檢查用水于鱟試劑中,輕輕振搖使鱟試劑完全溶解 |
5. 加樣 |
* 去無熱源試管,分別加入100μl細菌內毒素檢查用水、內毒素標準溶液,或供試品 |
6. 結果分子 |
* 進行讀數與結果計算 |
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服務優勢:
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--嚴格的質控體系,技能嫻熟的實驗技術人員,豐富的內毒素檢測經驗
--完善的實驗室儀器,齊全的檢測設備
--提供高性價比的檢測服務,檢測報告認可度高
--簡化檢測工作流程,在較短周期內完成實驗
--完整的上下游服務:可提供重組蛋白表達與制備、蛋白測序,蛋白標記修飾等一站式技術服務,節約客戶寶貴時間和成本
--服務可定制:針對客戶需求,提供詳細的實驗方案
如何訂購?
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