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卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年致力于蛋白相互作用研究,蛋白質相互作用能夠揭示分子之間的相互作用模式,有效揭示體內信號途徑轉導過程,對調控細胞及其信號具有重要意義。我們的科研專家積累了多年的蛋白互作研究與檢測經驗,憑借成熟技術能夠快速完成實驗內容,為客戶節省寶貴的時間和經費。此外,卡梅德生物也擁有豐富的重組標簽蛋白表達經驗,能夠在原核和真核表達系統為客戶表達帶有GST,Myc-tag,Flag-tag,HA-tag等標簽的重組蛋白??返律锝⒘顺墒斓?/span>蛋白表達平臺,擁有齊全的蛋白檢測設備及技術,卡梅德生物的免疫共沉淀以及Pull Down技術來源于日本京都大學IPS實驗室,能夠確保每一個實驗步驟精細控制,保證檢測結果準確、客觀、可信??返律飯猿譃榭蛻籼峁└咂焚|的服務內容,能夠提供從重組蛋白制備到蛋白表達及純化,蛋白互作研究等一站式技術服務,個性化定制服務滿足不同客戶的實驗需求。
免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)技術是以抗體和抗原之間的特異性免疫反應為基礎的用于研究蛋白質與多肽、蛋白與蛋白相互作用的經典方法,是確定蛋白質與多肽、蛋白與蛋白在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。該技術是利用抗體與抗原之間特異性結合,抗體能夠特異性的識別并結合樣品中的抗原,再利用瓊脂糖交聯的protein A/G特異性結合抗體,從而使抗原抗體復合物沉淀下來。經過洗脫,凝膠電泳分離,結合Western Blot 等技術定量或定性的分析樣品中特定抗原的含量情況。免疫共沉淀能夠驗證兩種蛋白質在細胞內的天然結合,符合體內實際情況,檢測結果可信度高。
免疫共沉淀實驗操作步驟較多,但每一步實驗步驟都十分關鍵,要想達到最終的實驗目的,不僅需要高質量的抗體,對免疫沉淀體系也需要嚴格的控制指標??返律锬軌驗榭蛻籼峁└咂焚|的免疫共沉淀技術服務??返律锏目蒲腥藛T嚴格控制實驗流程中的每個關鍵步驟的質量,保證客戶能夠得到理想的實驗結果。
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圖1 免疫共沉淀技術原理
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項目 |
免疫共沉淀-Co-IP實驗 |
實驗原理 |
* 該技術實驗原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。當用預先固化在瓊脂糖凝珠(argarose beads)上的蛋白質A的抗體免疫沉淀A蛋白,那么與A蛋白在體內結合的蛋白質B也能一起沉淀下來;再通過Western blot或LC-MS/MS對B蛋白進行檢測,進而證明兩者間的相互作用 |
應用 |
* 常用于驗證兩種已知蛋白的相互作用
* 尋找細胞內是否存在與已知蛋白相互作用的未知蛋白 |
優點 |
* 相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的,處于天然狀態
* 蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的,可以避免人為的影響
* 可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物 |
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免疫共沉淀技術主要實驗流程:
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服務優勢:
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--經驗豐富的實驗操作水平,科學的對照組設置,使用高品質的試劑盒進行實驗,protein A磁珠吸附效高,保證實驗成功率高
--使用銀染技術,靈敏度更高,SDS-PAGE電泳結果更加清晰,實驗結果更加準確可靠
--擁有完整配套檢測設備,完備的質譜、色譜系統,可對結果進一步進行分析
--經驗豐富的專家團隊做技術支持以解決各類CO-IP技術問題
--完整的信息分析,提供詳細的實驗報告,提供共沉淀產物, SDS-PAGE結果和Western Blot結果,可提供蛋白質鑒定結果(質譜結果)
--具有成熟的蛋白平臺,抗體制備等平臺,能夠提供真正的一站式服務體驗,節省客戶寶貴時間
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