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卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于重組蛋白表達與制備的研究,我們的科學家擁有豐富的重組蛋白植物表達的經驗,能夠為客戶提供快速準確的定制化服務,滿足客戶的項目需求。
植物作為一種生物反應器來生產醫藥用蛋白具有很多優點:1. 上游生產成本低;2. 基因轉化容易,成功率高,周期短,表達量高,提純容易,收效快;3. 轉基因植物自交后得到的同質后代遺傳性狀穩定,進而能在植物體內積累多基因;4. 不受噬菌體污染倒灌的威脅,動物病原菌污染??;5. 對比其它表達系統而言,植物表達系統更適用于大規模生產。
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卡梅德生物基于植物表達系統的特點,為客戶提供3種表達系統:穩定遺傳轉化表達系統、瞬時表達系統和葉綠體系統。
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不同植物表達系統的優點:
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分類 |
特點 |
穩定轉化系統 |
* 穩定轉化系統是將外源蛋白基因構建在植物表達載體上,利用農桿菌或基因等轉化的方法, 將目的基因轉化到植物細胞中并與基因組整合獲得穩定表達的轉基因植株。核基因組轉化雖然可以穩定遺傳, 能進行高級蛋白加工和修飾,但是表達量小,因涉及組織培養過程,因此實驗周期長,另外還存在基因漂移即環境、安全問題 |
葉綠體基因組轉化 |
* 葉綠體轉化系統是以葉綠體基因組為平臺對植物進行遺傳操作,通過一定方法使外源基因穿過細胞膜和葉綠體雙層膜進入葉綠體,在同源重組片段的介導下與葉綠體基因組之間發生同源重組,以定點整合方式進入葉綠體基因組,并在其中轉錄、翻譯并獲得終產 物的技術。葉綠體轉化可以實現外源蛋白高效表達、穩定遺傳 (胞質 )和轉基因花粉無逃逸風險,但無法完成復雜蛋白加工修飾,與原核生物類似 |
穩定蛋白表達(可選) |
* 目的基因插入雙元表達載體 * 轉化農桿菌,體外表達外源蛋白 * 農桿菌和外源蛋白混合滲透煙葉,混合培養
* 繼代培養,轉基因培株,生產蛋白 |
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服務內容:
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項目內容 |
服務內容(以煙草為例) |
周期 |
植物組織培養 |
* 培養煙草可以為農桿菌的滲透提供健康葉片
* 葉片生長至手掌大小,可用于農桿菌滲透 |
6-8周 |
基因克隆及載體構建 |
* 擴增/鑒定基因片段或合成目的基因,插入農桿菌表達質粒 * PCR及測序檢測確定亞克隆基因
* 交付:測序數據和實驗方案 |
1-2周 |
瞬時蛋白表達 |
* 重組質粒轉染農桿菌 * 農桿菌注射滲透煙葉中 * 提取純化蛋白 * SDS-PAGE和WB檢測
* 交付:重組蛋白0.1-3mg,純度>85%,標準實驗報告 |
3-4周 |
穩定蛋白表達(可選) |
* 目的基因插入雙元表達載體 * 轉化農桿菌,體外表達外源蛋白 * 農桿菌和外源蛋白混合滲透煙葉,混合培養
* 繼代培養,轉基因培株,生產蛋白 |
?2-3年 |
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生物反應器:
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請參考:植物遺傳轉化服務
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客戶提供:
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客戶需提供目的基因序列或登錄號,指定或提供生物反應器
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交付內容:
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--表達載體
--克隆農桿菌
--重組蛋白0.1-3mg,純度>≥85%
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如何訂購?
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