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卡梅德生物科技(KMD?Bioscience)多年來致力于重組蛋白表達與純化的相關研究,每年可完成上百組蛋白的表達與純化服務,建立了完善的蛋白純化體系,可根據客戶的不同需求提供多元化的蛋白純化方案??返律锟梢詾榭蛻籼峁┮粚σ坏膫€性化方案定制,根據蛋白性質設計親和純化、離子交換、分子篩、疏水層析等多種蛋白純化實驗方案,可純化有/無標簽的重組蛋白和多種種屬組織中的天然蛋白并獲得高標準和高純度的目標蛋白質,以滿足客戶的項目需求,為客戶的下游實驗研究提供強有力的支持。
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重組蛋白純化:
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重組蛋白分離純化一般分為三種:含標簽的重組蛋白純化、不含標簽的重組蛋白純化以及包涵體變性與復性純化。
含標簽的重組蛋白純化:組氨酸標簽(His-tag)是使用范圍較為廣泛的一種蛋白純化標簽,其純化的原理是組氨酸殘基上的咪唑基團可與層析介質中的金屬離子螯合,再通過提高緩沖液中咪唑濃度進行競爭性洗脫達到純化效果,這種純化標簽的優點在于His-Tag的分子質量非常小且幾乎不會對目的蛋白本身的生物學功能及特性產生影響,因此帶有His-Tag的蛋白純化后可直接作為抗原免疫動物制備抗體并不會影響抗體的特異性??返律镞€提供其他多種類型標簽的蛋白純化服務,如GST-Tag、SUMO-Tag、MBP-Tag等。
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圖1 6xHis標簽和Ni-NTA相鄰殘基之間的相互作用
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不含標簽的重組蛋白純化:不含純化標簽的重組蛋白我們會根據客戶的樣品及需求全面分析蛋白性質,結合分子篩、離子柱、疏水色譜,綜合制定純化方案,一般會采用抗體親和純化方法,利用靶向配體能與目的蛋白特異性結合的特性將目的蛋白分離出來;或選用分子篩進行分離純化。
包涵體變性與復性純化:將以包涵體形式存在的蛋白進行變復性操作,根據蛋白質不同的性質,可以選擇尿素、鹽酸胍、去垢劑、極端pH等,以保證獲得單體狀態的變性蛋白。
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卡梅德生物提供的蛋白分離純化流程:
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步驟 |
服務內容 |
周期 |
Step1 純化前檢測與純化小試 |
* SDS-PAGE檢測蛋白情況 * 小體積純化與檢測
(1)離子交換層析(緩沖液、填料、洗脫條件、鹽梯度等條件摸索)
(2)硫酸銨分級沉淀和疏水層析
(3)分子篩分離純化(條件摸索)
(4)純化條件優化摸索 (5)目的條帶質譜鑒定(可選) |
2-3周 |
Step2 蛋白純化及檢測 |
*大量純化(根據小試條件放大)
* SDS-PAGE(純度驗證)
* WB檢測(視項目而定) * 濃度檢測(紫外吸收、BCA法等) |
2-3周 |
交付 |
成品蛋白,純化報告,圖片數據 |
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服務優勢:
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--設備先進,純化方式多元化,適合不同性質的重組蛋白
--專業的技術團隊和豐富的經驗
--先進的AKTA純化系統和多種規格的預裝純化柱,適合純化不同來源的重組蛋白或天然蛋白
--多種蛋白純化系統(親和色譜、離子交換、分子篩、疏水色譜、HPLC等)可供選擇
--專業技術團隊為您量身定制合適的純化方案,獲得能夠滿?下游實驗的?純度蛋?
--提供全面的蛋白純化分析報告
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如何訂購?
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