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卡梅德生物(KMD Bioscience)從事微生物基因編輯多年,已擁有了完善的基因編輯技術平臺,我們的基因編輯技術平臺擁有經驗豐富的技術人員,有效的實驗流程以及完善的實驗設備。我們的科學家可根據客戶的具體需求進行一對一的方案定制,提供多種微生物的編輯服務,以滿足客戶的需求。
不動桿菌 (Acinetobacter) 為革蘭陰性桿菌,大小為(0.9~1.6)μm×(1.5~2.5)μm,革蘭染色有時不易脫色,多為球桿狀、常呈雙排列,可單個存在,有時形成絲狀和鏈狀,黏液型菌株有莢膜,無芽孢,無鞭毛。本菌屬非發酵菌是條件致病菌,當機體抵抗力降低時易引起機體感染,是引起醫院內感染的重要機會致病菌之一。本屬細菌本屬細菌專性需氧,適宜生長溫度為35℃;營養要求不高,在普通培養基上生長良好;在麥康凱培養基上生長良好,無色或粉紅色菌落,部分菌株呈黏液狀;在血平板上形成圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊的灰白色菌落(溶血不動桿菌可產生β溶血)。近年來,不動桿菌的耐藥性呈上升趨勢,通過基因編輯的技術對其進行靶基因的插入、敲除及替換,以期為降低不動桿菌的致病性和耐藥性提供有力的工具。
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傳統λRed同源重組法:
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地衣芽孢桿菌基因敲除的傳統方法是利用其自身的Rec A同源重組系統編碼的RecA和RecBCD蛋白介導DNA的同源重組。但是以該系統為基礎的基因打靶存在較多的缺點:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,線性的打靶DNA將被降解,打靶基因必須整合于戴體上才能進行同源重組;其次,打靶片段需要較長的同源臂,往往長達幾百個堿基,而且同源重組效率低,往往不能得到所需的重組子。
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圖1?傳統λRed同源重組法
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CRISPR/Cas9基因編輯技術:
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CRISPR-Cas9基因編輯技術就是通過人工設計的 sgRNA(guide RNA)來識別目的基因組序列,并引導 Cas9 蛋白酶進行有效切割 DNA 雙鏈,形成雙鏈斷裂,損傷后修復會造成基因敲除或敲入等,最終達到對基因組DNA 進行修飾的目的。相較于傳統的同源重組敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因編輯技術速度更快,無痕,結果更準確,非常便于您開展后續的實驗研究。
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?圖2 CRISPR/Cas9基因編輯技術
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服務內容:
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服務內容 |
周期 |
基因敲除 |
客戶提供:
* 需改造的菌株信息
* 敲除的序列信息 |
5-8周 |
基因敲入或點突變 |
客戶提供:
* 需改造的菌株信息
* 敲除的序列信息/突變位點信息 |
5-8周 |
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卡梅德生物科技多年致力于微生物基因組編輯服務,主要可為您提供傳統λRed同源重組法和CRISPR/Cas9技術實現高度準確和有效的無疤痕基因組編輯。我司提供的微生物基因編輯系統主要包括大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、沙門氏菌、畢赤酵母、釀酒酵母、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、銅綠甲假單胞菌和乳酸菌等。您也可以根據自己的需求指定其他微生物菌屬,具體情況還需與我們專業的技術人員聯系。
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服務優勢:
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--快速的實驗周期,節省客戶成本
--成熟的實驗技術,實現無疤痕基因組編輯
--多種微生物的基因編輯系統,適用于客戶的多種項目
--可為新微生物開發 CRISPR 方法提供有力的技術支持
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