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卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于穩定細胞株構建服務研究。高質量的穩定細胞系廣泛應用于信號傳導,藥物靶點研究,免疫治療藥物開發等多種研究領域??返律镌诜€定細胞株構建方面積累了豐富的經驗,已在多個種屬細胞中成功構建過表達和RNAi穩轉細胞株。我們的細胞技術人員準確把控實驗環節中的每一步操作,輔以嚴格的流程管理體系,讓復雜、重復性要求高的實驗更有保障??返律锝⒘送晟频?/span>細胞生物學技術平臺和標準先進的細胞實驗室,擁有品種齊全的細胞庫資源,涵蓋超過300多種的腫瘤細胞和原代細胞,外源基因表達鑒定嚴格,檢測方法多樣, q-PCR, ELISA,Western blot等各種技術可供選擇,我們堅持為客戶提供高質量的基因過表達、沉默穩轉細胞系構建等多種服務??返律镆劳邢冗M的技術和科研團隊,可根據您的實驗目的,量身設計切實可行的實驗方案,構建高品質穩定細胞系。
目的基因沉默是研究基因功能常用的手段之一?;诳返律锏腎OS(Integration Operating System)重組技術,我們可為您提供目的基因的沉默穩定株系構建服務。利用IOS技術,將目的shRNA靶點定點整合到經過篩選驗證過的基因組高表達活性位點中,這些位點不僅安全(無基因),而且基因表達量更高(活躍表達位點),因此可以實現shRNA的高活性轉錄表達,進而對目的基因造成干擾,達到目的基因沉默的目的,并能長期穩定遺傳,構建穩定細胞株系,同時縮短了實驗周期,節省客戶寶貴時間。除此之外,我們也可以提供瞬時表達服務,構建瞬轉株系。
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技術原理:
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項目 |
IOS沉默(RNAi)穩轉細胞系構建服務 |
實驗原理 |
* 穩轉細胞系技術原理:用轉染質?;虿《靖腥镜姆椒▽嫿ê玫暮庠?/span>DNA的載體導入細胞,根據不同的基因載體中所含的抗性標志選用相應的藥物進行選擇性篩選,得到穩定沉默特定基因表達的細胞系 |
優點 |
采用IOS 技術具有以下優勢:
* shRNA 為定點整合,非隨機整合
* shRNA 為穩定遺傳,傳代過程中,不會丟失基因大小不影響整合的效率
* 保證細胞傳代過程中,基因的沉默效率保持一致,方便進行科學研究 |
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在基因功能的研究中,目的基因是否有效導入靶細胞,是功能研究的前提條件之一。根據不同的實驗需求可以選擇瞬時轉染/感染和穩轉細胞株構建。兩者的特點分別為:
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服務 |
特點 |
瞬時轉染/感染 |
* 外源DNA不整合到宿主的染色體中,一個宿主細胞中可以存在多個拷貝數,產生短時間內的高水平的表達
* 外源基因的表達水平不存在整合位點的問題,不會受到周圍染色體元件影響
* 瞬時轉染所需的人力和時間比穩轉少,但DNA攝入效率和表達水平在不同實驗中差異較大,表達不長久也不穩定 |
穩轉細胞株 |
* 外源基因進入受體細胞并整合到細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因
* 穩定表達細胞株彌補了瞬時感染(或轉染)實驗中外源基因表達時間短的缺陷,便于長期觀察
* 穩轉細胞的篩選需根據不同基因載體中所含有的抗性標志選用相應的藥物 |
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項目流程:
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服務優勢:
--成熟穩定的細胞平臺:擁有品種齊全的細胞庫資源,多種不同啟動子和標簽的表達載體可供選擇,還可以選擇多種報告基因和親和標簽
--可同時抑制多個基因的表達
--利用IOS技術,可以快速將 shRNA 整合到細胞的基因組中,實現目的基因的穩定沉默,縮短實驗周期
--設施齊全,擁有標準細胞實驗室,實驗體系成熟,配備齊全的實驗儀器
--經驗豐富的實驗技術人員,精湛的操作水平,較好的電轉成功率,能夠轉染大多數細胞,表達效率高
--細胞來源清晰可追溯,質量有保證:無細菌、真菌和支原體污染
--具備完善的細胞、抗體、蛋白等服務平臺,能夠提供從穩定細胞系構建到重組蛋白生產等一站式技術服務
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如何訂購?
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