卡梅德生物科技（天津）有限公司
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郵箱：info@kmdbioscience.com
卡梅德生物（KMD?Bioscience）擁有高素質的專家和十多年的上游生物制藥開發經驗，為您提供重組蛋白表達與抗體制備研究服務。卡梅德生物采用GS/DHFR表達系統。將進行瞬時轉染評估以確保選擇穩定的單克隆。我們的細胞系廣泛用于基因功能研究、基因編輯、藥物篩選和重組蛋白生產。
DHFR體系是目前被廣泛使用的體系，并且也是在工業生產中常用的方法。但該體系的缺點也是很明顯的，耗時耗力費時費力，并且獲得高產克隆需要重復選擇和克隆的循環。此外，通過Dhfr?/Mtx 方法獲得的高產克隆通常不穩定隨著細胞培養時間的延長，蛋白質合成迅速減少。
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DHFR系統工作原理：
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圖1顯示了 DHFR 酶如何催化葉酸轉化為四氫葉酸。這種前體是細胞復制的，嘌呤和嘧啶從頭合成所必需的。
當 CHO 細胞中的蛋白質表達系統有 DHFR 缺失時，研究人員用重組 DNA轉染CHO 細胞，該 DNA 由與 DHFR 基因緊密相連的目的基因組成。甲氨蝶呤 (MTX) 選擇系統用于選擇產生目標蛋白質的 CHO 細胞。MTX 是一種類似于葉酸的藥物，它與 DHFR 結合，從而抑制四氫葉酸的產生，而四氫葉酸是嘌呤和嘧啶從頭合成所必需的。
在基因擴增過程中，CHO 細胞在越來越高水平的 MTX 中培養。將選擇具有增加的 DHFR 基因拷貝并結合感興趣的基因的 CHO 細胞。
DHFR 水平不足的 CHO 細胞被剝奪了核苷前體（次黃嘌呤和胸苷）并死亡。一旦被選中，來自 CHO?DHFR 陰性宿主的轉染細胞系不需要培養基中的 MTX。?
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圖1 DHFR 酶催化葉酸轉化為四氫葉酸?
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CHO-DHFR系統的表達載體：
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卡梅德生物的科學家設計了專用于CHO-DHFR系統的載體，即pKMD-CHO-DHFR載體。此外，卡梅德的科學家可根據客戶的項目需求為您定制表達質粒，詳情請與卡梅德生物的銷售經理聯系。
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服務內容：
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項目 |
客戶提供 |
交付內容 |
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CHO哺乳表達細胞系構建 |
目標序列 |
* 克隆表達載體
* 穩定表達的單克隆
* 成品蛋白（量可達7g/L）
* 實驗報告 |
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服務優勢：
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--我們的專家經驗豐富，實驗成功率高
--我們還為您的下一步實驗提供優化的細胞培養和生產方案
--多重表達模式：穩定表達和瞬時表達
--多種融合標簽載體和宿主，以保證高可溶蛋白表達和高蛋白活性
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如何訂購？
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